പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിലെ കാർബോക്‌സിൽ ഈസ്റ്റർ ബോണ്ടിൽ പ്രവർത്തിക്കുന്ന എൻസൈമുകൾ

കാർബോക്‌സിൽ ഈസ്റ്റർ ബോണ്ടുകളെ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യുന്ന എൻസൈമുകൾ പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.ഫോസ്ഫോളിപ്പിഡുകൾ, അസറ്റൈൽ കോളിൻ, ആരോമാറ്റിക് അസറ്റേറ്റ് എന്നിവയാണ് ജലവിശ്ലേഷണത്തിനുള്ള അടിവസ്ത്രങ്ങൾ.ഈ എൻസൈമുകളിൽ മൂന്ന് തരം ഉൾപ്പെടുന്നു: ഫോസ്ഫോളിപേസ്, അസറ്റൈൽകോളിനെസ്റ്ററേസ്, ആരോമാറ്റിക് എസ്റ്ററേസ്.പാമ്പ് വിഷത്തിലെ അർജിനൈൻ എസ്റ്ററേസിന് സിന്തറ്റിക് അർജിനൈൻ അല്ലെങ്കിൽ ലൈസിൻ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയും, പക്ഷേ ഇത് പ്രധാനമായും പ്രകൃതിയിലെ പ്രോട്ടീൻ പെപ്റ്റൈഡ് ബോണ്ടുകളെ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യുന്നു, അതിനാൽ ഇത് പ്രോട്ടീസിന്റേതാണ്.ഇവിടെ ചർച്ച ചെയ്യുന്ന എൻസൈമുകൾ ഈസ്റ്റർ സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകളിൽ മാത്രമേ പ്രവർത്തിക്കൂ, ഒരു പെപ്റ്റൈഡ് ബോണ്ടിലും പ്രവർത്തിക്കാൻ കഴിയില്ല.ഈ എൻസൈമുകളിൽ, അസറ്റൈൽകോളിനെസ്റ്ററേസ്, ഫോസ്ഫോളിപേസ് എന്നിവയുടെ ജൈവ പ്രവർത്തനങ്ങൾ കൂടുതൽ പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നതും പൂർണ്ണമായി പഠിച്ചതുമാണ്.ചില പാമ്പുവിഷങ്ങൾക്ക് ശക്തമായ ആരോമാറ്റിക് എസ്റ്ററേസ് പ്രവർത്തനമുണ്ട്, അവയ്ക്ക് പി-നൈട്രോഫെനൈൽ എഥൈൽ ഈസ്റ്റർ, എ-അല്ലെങ്കിൽ പി-നാഫ്താലിൻ അസറ്റേറ്റ്, ഇൻഡോൾ എഥൈൽ ഈസ്റ്റർ എന്നിവ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയും.ഈ പ്രവർത്തനം ഒരു സ്വതന്ത്ര എൻസൈം ഉപയോഗിച്ചാണോ അതോ കാർബോക്‌സിലെസ്‌റ്ററേസിന്റെ അറിയപ്പെടുന്ന പാർശ്വഫലമാണോ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നതെന്ന് ഇപ്പോഴും അജ്ഞാതമാണ്, അതിന്റെ ജൈവിക പ്രാധാന്യം പറയട്ടെ.അഗ്കിസ്ട്രോഡോൺ ഹാലിസ് ജാപ്പോണിക്കസിന്റെ വിഷം പി-നൈട്രോഫെനൈൽ എഥൈൽ എസ്റ്ററും ഇൻഡോൾ എഥൈൽ എസ്റ്ററും ഉപയോഗിച്ച് പ്രതിപ്രവർത്തിച്ചപ്പോൾ, പി-നൈട്രോഫെനോൾ, ഇൻഡോൾ ഫിനോൾ എന്നിവയുടെ ഹൈഡ്രോലൈസേറ്റുകൾ കണ്ടെത്തിയില്ല;നേരെമറിച്ച്, ഈ എസ്റ്ററുകൾ കോബ്ര ഷൗഷാൻ ഉപജാതികളായ പാമ്പ് വിഷം, ബംഗറസ് മൾട്ടിസിങ്ക്റ്റസ് പാമ്പ് വിഷം എന്നിവയുമായി പ്രതിപ്രവർത്തിക്കുകയാണെങ്കിൽ, അവ പെട്ടെന്ന് ജലവിശ്ലേഷണം ചെയ്യപ്പെടും.ഈ മൂർഖൻ വിഷങ്ങൾക്ക് ശക്തമായ കോളിൻസ്റ്ററേസ് പ്രവർത്തനം ഉണ്ടെന്ന് അറിയാം, ഇത് മുകളിലുള്ള അടിവസ്ത്രങ്ങളുടെ ജലവിശ്ലേഷണത്തിന് കാരണമാകാം.വാസ്തവത്തിൽ, Mclean et al.(1971) ഇൻഡോൾ എഥൈൽ ഈസ്റ്റർ, നാഫ്താലിൻ ഈഥൈൽ എസ്റ്റർ, ബ്യൂട്ടൈൽ നാഫ്താലിൻ ഈസ്റ്റർ എന്നിവയെ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാൻ കോബ്ര കുടുംബത്തിൽപ്പെട്ട പല പാമ്പുകളികൾക്കും കഴിയുമെന്ന് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു.ഈ പാമ്പിന്റെ വിഷങ്ങൾ വരുന്നത്: മൂർഖൻ, കറുത്ത കഴുത്തുള്ള മൂർഖൻ, കറുത്ത ചുണ്ടുള്ള മൂർഖൻ, സ്വർണ്ണ മൂർഖൻ, ഈജിപ്ഷ്യൻ മൂർഖൻ, രാജവെമ്പാല, ഗോൾഡൻ കോബ്ര മാമ്പ, ബ്ലാക്ക് മാമ്പ, വെളുത്ത ചുണ്ടുള്ള മാമ്പ (ഡി. ഓയ്‌ക്ക് ഇപ്പോഴും കിഴക്കൻ റോമ്പോള റാറ്റിൽസ്‌നേക്ക് അറിയാം.

പാമ്പ് വിഷത്തിന് മീഥൈൽ ഇൻഡോൾ എഥൈൽ എസ്റ്ററിനെ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയും, ഇത് സെറമിലെ കോളിൻസ്റ്ററേസ് പ്രവർത്തനം നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള അടിവസ്ത്രമാണ്, എന്നാൽ ഈ പാമ്പ് വിഷം കോളിൻസ്റ്ററേസ് പ്രവർത്തനം കാണിക്കുന്നില്ല.കോളിൻസ്റ്ററേസിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായ ഒരു അജ്ഞാത എസ്റ്ററേസ് കോബ്ര വിഷത്തിൽ ഉണ്ടെന്ന് ഇത് കാണിക്കുന്നു.ഈ എൻസൈമിന്റെ സ്വഭാവം മനസിലാക്കാൻ, കൂടുതൽ വേർതിരിക്കൽ ജോലി ആവശ്യമാണ്.

1, ഫോസ്ഫോലിപേസ് A2

(I) അവലോകനം

ഗ്ലിസറിൻ ഫോസ്ഫേറ്റ് ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയുന്ന ഒരു എൻസൈമാണ് ഫോസ്ഫോലിപേസ്.പ്രകൃതിയിൽ 5 തരം ഫോസ്ഫോളിപേസ് ഉണ്ട്, അതായത് ഫോസ്ഫോളിപേസ് A2, ഫോസ്ഫോളിപേസ്.

A., phospholipase B, phospholipase C, phospholipase D. പാമ്പ് വിഷത്തിൽ പ്രധാനമായും ഫോസ്ഫോളിപേസ് A2 (PLA2) അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, കുറച്ച് പാമ്പിന്റെ വിഷങ്ങളിൽ ഫോസ്ഫോളിപേസ് B അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, മറ്റ് ഫോസ്ഫോളിപേസുകൾ പ്രധാനമായും മൃഗകലകളിലും ബാക്ടീരിയകളിലും കാണപ്പെടുന്നു.അടിവസ്ത്ര ജലവിശ്ലേഷണത്തിൽ ഈ ഫോസ്ഫോളിപേസുകളുടെ പ്രവർത്തന സ്ഥലം ചിത്രം 3-11-4 കാണിക്കുന്നു.

ഫോസ്ഫോളിപേസുകളിൽ, PLA2 കൂടുതൽ പഠിച്ചു.പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിൽ ഏറ്റവും കൂടുതൽ പഠിക്കപ്പെട്ട എൻസൈം ഇതായിരിക്കാം.Sn-3-ഗ്ലിസറോഫോസ്ഫേറ്റിന്റെ രണ്ടാം സ്ഥാനത്തുള്ള ഈസ്റ്റർ ബോണ്ടാണ് ഇതിന്റെ അടിവസ്ത്രം.ഈ എൻസൈം പാമ്പ് വിഷം, തേനീച്ച വിഷം, തേളിന്റെ വിഷം, മൃഗകലകൾ എന്നിവയിൽ വ്യാപകമായി കാണപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ PLA2 നാല് കുടുംബ പാമ്പ് വിഷങ്ങളിൽ ധാരാളമായി കാണപ്പെടുന്നു.ഈ എൻസൈം ചുവന്ന രക്താണുക്കളെ തകർക്കുകയും ഹീമോലിസിസിന് കാരണമാവുകയും ചെയ്യുന്നതിനാൽ ഇതിനെ "ഹീമോലിസിൻ" എന്നും വിളിക്കുന്നു.ചില ആളുകൾ PLA2 ഹീമോലിറ്റിക് ലെസിത്തിനേസ് എന്നും വിളിക്കുന്നു.

എൻസൈമുകൾ വഴി ലെസിതിനിൽ പ്രവർത്തിച്ച് പാമ്പ് വിഷത്തിന് ഒരു ഹീമോലിറ്റിക് സംയുക്തം ഉത്പാദിപ്പിക്കാൻ കഴിയുമെന്ന് ലുഡീക്ക് ആദ്യമായി കണ്ടെത്തി.പിന്നീട്, Delezenne et al.മൂർഖൻ വിഷം കുതിരയുടെ സെറം അല്ലെങ്കിൽ മഞ്ഞക്കരു എന്നിവയിൽ പ്രവർത്തിക്കുമ്പോൾ അത് ഒരു ഹീമോലിറ്റിക് പദാർത്ഥമായി മാറുന്നുവെന്ന് തെളിയിച്ചു.എറിത്രോസൈറ്റ് മെംബ്രണിലെ ഫോസ്ഫോളിപ്പിഡുകളിൽ PLA2 നേരിട്ട് പ്രവർത്തിക്കുമെന്ന് ഇപ്പോൾ അറിയാം, ഇത് ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ഘടനയെ നശിപ്പിക്കുകയും നേരിട്ട് ഹീമോലിസിസ് ഉണ്ടാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു;പരോക്ഷമായ ഹീമോലിസിസ് ഉത്പാദിപ്പിക്കാൻ ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ പ്രവർത്തിക്കുന്ന ഹീമോലിറ്റിക് ലെസിത്തിൻ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്നതിന് ഇത് സെറമിൽ പ്രവർത്തിക്കുകയോ ലെസിത്തിൻ ചേർക്കുകയോ ചെയ്യാം.പാമ്പ് വിഷത്തിന്റെ നാല് കുടുംബങ്ങളിൽ PLA2 ധാരാളമാണെങ്കിലും, വിവിധ പാമ്പുകളുടെ വിഷങ്ങളിലെ എൻസൈമുകളുടെ ഉള്ളടക്കം അല്പം വ്യത്യസ്തമാണ്.റാറ്റിൽസ്‌നേക്ക് (സി

പാമ്പിന്റെ വിഷം ദുർബലമായ PLA2 പ്രവർത്തനം മാത്രമാണ് കാണിക്കുന്നത്.ചൈനയിലെ വിഷമുള്ള പാമ്പുകളുടെ 10 പ്രധാന വിഷങ്ങളുടെ PLA2 പ്രവർത്തനത്തിന്റെ താരതമ്യം പട്ടിക 3-11-11 വ്യക്തമാക്കുന്നു.

പട്ടിക 3-11-11 ചൈനയിലെ 10 പാമ്പ് വിഷങ്ങളുടെ ഫോസ്ഫോളിപേസ് VIII പ്രവർത്തനങ്ങളുടെ താരതമ്യം

പാമ്പിന്റെ വിഷം

കൊഴുപ്പ് റിലീസ്

അലിഫാറ്റിക് ആസിഡ്,

Cjumol/mg)

ഹീമോലിറ്റിക് പ്രവർത്തനം CHU50/^ g * ml)

പാമ്പിന്റെ വിഷം

ഫാറ്റി ആസിഡുകൾ പുറത്തുവിടുക

(^raol/mg)

ഹീമോലിറ്റിക് പ്രവർത്തനം "(HU50/ftg * 1111)

നജനജ അത്ര

9. 62

പതിനൊന്ന്

മൈക്രോസെഫൽ ഒഫിസ്

അഞ്ച് പോയിന്റ് ഒരു പൂജ്യം

കലിസ്പല്ലസ്

8. 68

രണ്ടായിരത്തി എണ്ണൂറ്

ഗ്രാസിലിസ്

വി, അക്യുട്ടസ്

7. 56

** #

ഒഫിയോഫാഗസ് ഹന്ന

മൂന്ന് പോയിന്റ് എട്ട് രണ്ട്

നൂറ്റിനാല്പത്

Bnugarus fasctatus

7,56

ഇരുനൂറ്റി എൺപത്

ബി. മൾട്ടിസിൻക്റ്റസ്

ഒരു പോയിന്റ് ഒമ്പത് ആറ്

ഇരുനൂറ്റി എൺപത്

വൈപ്പർ എ റസ്സല്ലി

ഏഴ് പോയിന്റ് പൂജ്യം മൂന്ന്

ടി, മ്യൂക്രോസ്ക്വാമാറ്റസ്

ഒരു പോയിന്റ് എട്ട് അഞ്ച്

സയാമെൻസിസ്

ടി. സ്റ്റെജ്നെഗേരി

0. 97

(2) വേർപിരിയലും ശുദ്ധീകരണവും

പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിലെ PLA2 ന്റെ ഉള്ളടക്കം വളരെ വലുതാണ്, അത് ചൂട്, ആസിഡ്, ക്ഷാരം, ഡീനാറ്ററന്റ് എന്നിവയ്ക്ക് സ്ഥിരതയുള്ളതാണ്, അതിനാൽ PLA2 ശുദ്ധീകരിക്കാനും വേർതിരിക്കാനും എളുപ്പമാണ്.ആദ്യം അസംസ്കൃത വിഷത്തിൽ ജെൽ ഫിൽട്ടറേഷൻ നടത്തുക, തുടർന്ന് അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി നടത്തുക, അടുത്ത ഘട്ടം ആവർത്തിക്കുക എന്നതാണ് പൊതുവായ രീതി.അയോൺ എക്സ്ചേഞ്ച് ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക്ക് ശേഷം PLA2 ഫ്രീസ്-ഡ്രൈയിംഗ് അഗ്രഗേഷൻ ഉണ്ടാക്കാൻ പാടില്ല എന്നത് ശ്രദ്ധിക്കേണ്ടതാണ്, കാരണം ഫ്രീസ്-ഡ്രൈയിംഗ് പ്രക്രിയ പലപ്പോഴും സിസ്റ്റത്തിലെ അയോണിക് ശക്തി വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു, ഇത് PLA2 കൂട്ടിച്ചേർക്കുന്നതിന് കാരണമാകുന്ന ഒരു പ്രധാന ഘടകമാണ്.മേൽപ്പറഞ്ഞ പൊതുവായ രീതികൾ കൂടാതെ, ഇനിപ്പറയുന്ന രീതികളും സ്വീകരിച്ചിട്ടുണ്ട്: ① വെൽസ് et al.② PLA2 ന്റെ സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് അനലോഗ് അഫിനിറ്റി ക്രോമാറ്റോഗ്രഫിക്ക് ലിഗാന്റായി ഉപയോഗിച്ചു.ഈ ലിഗാന്റിന് Ca2+ ഉള്ള പാമ്പ് വിഷത്തിൽ PLA2 മായി ബന്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയും.EDTA കൂടുതലും എല്യൂയന്റായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.Ca2+ നീക്കം ചെയ്തതിന് ശേഷം, PLA2 ഉം ലിഗാന്റും തമ്മിലുള്ള ബന്ധം കുറയുന്നു, അത് ലിഗാൻറിൽ നിന്ന് വേർപെടുത്താവുന്നതാണ്.മറ്റുള്ളവർ 30% ഓർഗാനിക് ലായനി അല്ലെങ്കിൽ 6mol/L യൂറിയ എലിയൻറായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.③ കാർഡിയോടോക്സിനിലെ PLA2 ട്രെയ്സ് നീക്കം ചെയ്യുന്നതിനായി PheiiylSephar0SeCL-4B ഉപയോഗിച്ച് ഹൈഡ്രോഫോബിക് ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി നടത്തി.④ PLA2-ൽ അഫിനിറ്റി ക്രോമാറ്റോഗ്രഫി നടത്താൻ ആന്റി PLA2 ആന്റിബോഡി ലിഗാൻഡായി ഉപയോഗിച്ചു.

ഇതുവരെ, പാമ്പ് വിഷം PLAZ ഒരു വലിയ സംഖ്യ ശുദ്ധീകരിച്ചു.Tu et al.(1977) 1975-ന് മുമ്പ് പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിൽ നിന്ന് ശുദ്ധീകരിച്ച PLA2 പട്ടികപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട്. സമീപ വർഷങ്ങളിൽ, PLA2-നെ വേർതിരിക്കുന്നതിനെയും ശുദ്ധീകരിക്കുന്നതിനെയും കുറിച്ച് ധാരാളം ലേഖനങ്ങൾ എല്ലാ വർഷവും റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെടുന്നു.ഇവിടെ, ചൈനീസ് പണ്ഡിതന്മാർ PLA-യെ വേർതിരിക്കുന്നതിലും ശുദ്ധീകരിക്കുന്നതിലും ഞങ്ങൾ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്നു.

ചെൻ യുവാൻകോങ് തുടങ്ങിയവർ.(1981) മൂന്ന് PLA2 സ്പീഷീസുകളെ ഷെജിയാങ്ങിലെ അഗ്കിസ്ട്രോഡൺ ഹാലിസ് പല്ലാസിന്റെ വിഷത്തിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചു, അവയെ അവയുടെ ഐസോഇലക്ട്രിക് പോയിന്റുകൾ അനുസരിച്ച് അമ്ലവും നിഷ്പക്ഷവും ആൽക്കലൈൻ PLA2 ആയി തിരിക്കാം.അതിന്റെ വിഷാംശം അനുസരിച്ച്, ന്യൂട്രൽ PLA2 കൂടുതൽ വിഷാംശമുള്ളതാണ്, ഇത് പ്രിസൈനാപ്റ്റിക് ന്യൂറോടോക്സിൻ അഗ്കിസ്ട്രോഡോടോക്സിൻ എന്ന് തിരിച്ചറിഞ്ഞിട്ടുണ്ട്.ആൽക്കലൈൻ PLA2 വിഷാംശം കുറവാണ്, കൂടാതെ അസിഡിക് PLA2 ന് വിഷാംശം ഇല്ല.വു സിയാങ്ഫു et al.(1984) തന്മാത്രാ ഭാരം, അമിനോ ആസിഡ് ഘടന, എൻ-ടെർമിനൽ, ഐസോഇലക്‌ട്രിക് പോയിന്റ്, താപ സ്ഥിരത, എൻസൈം പ്രവർത്തനം, വിഷാംശം, ഹീമോലിറ്റിക് പ്രവർത്തനം എന്നിവയുൾപ്പെടെ മൂന്ന് PLA2-കളുടെ സവിശേഷതകൾ താരതമ്യം ചെയ്തു.അവയ്ക്ക് സമാനമായ തന്മാത്രാ ഭാരവും താപ സ്ഥിരതയും ഉണ്ടെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു, എന്നാൽ മറ്റ് വശങ്ങളിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളുണ്ടായിരുന്നു.എൻസൈം പ്രവർത്തനത്തിന്റെ വശം, ആൽക്കലൈൻ എൻസൈം പ്രവർത്തനത്തേക്കാൾ ആസിഡ് എൻസൈം പ്രവർത്തനം കൂടുതലായിരുന്നു;എലിയിലെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ ആൽക്കലൈൻ എൻസൈമിന്റെ ഹീമോലിറ്റിക് പ്രഭാവം ഏറ്റവും ശക്തമായിരുന്നു, തുടർന്ന് ന്യൂട്രൽ എൻസൈം, ആസിഡ് എൻസൈം ഹീമോലൈസ് ചെയ്തിട്ടില്ല.അതിനാൽ, PLAZ-ന്റെ ഹീമോലിറ്റിക് പ്രഭാവം PLA2 തന്മാത്രയുടെ ചാർജുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നുവെന്ന് ഊഹിക്കപ്പെടുന്നു.Zhang Jingkang et al.(1981) അക്കിസ്ട്രോഡോടോക്സിൻ പരലുകൾ ഉണ്ടാക്കി.Tu Guangliang et al.(1983) ഫ്യൂജിയാനിൽ നിന്നുള്ള വൈപ്പറ റൊട്ടണ്ടസിന്റെ വിഷത്തിൽ നിന്ന് 7. 6 എന്ന ഐസോഇലക്‌ട്രിക് പോയിന്റുള്ള ഒരു വിഷലിപ്തമായ PLA വേർതിരിച്ച് ശുദ്ധീകരിച്ചതായി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തു. - ടെർമിനൽ നിശ്ചയിച്ചു.ലി യുഷെങ് തുടങ്ങിയവർ.(1985) ഫ്യൂജിയാനിലെ വൈപ്പർ റോട്ടണ്ടസിന്റെ വിഷത്തിൽ നിന്ന് മറ്റൊരു PLA2 വേർതിരിച്ച് ശുദ്ധീകരിച്ചു.PLA2 * ന്റെ ഉപയൂണിറ്റ് 13 800 ആണ്, ഐസോഇലക്‌ട്രിക് പോയിന്റ് 10.4 ആണ്, നിർദ്ദിഷ്ട പ്രവർത്തനം 35/xnioI/miri mg ആണ് എൽഡി5 എലികളിൽ ഇൻട്രാവെൻസായി കുത്തിവയ്ക്കുന്നു.ഇത് 0.5 ± 0.12mg/kg ആണ്.ഈ എൻസൈമിന് വ്യക്തമായ ആൻറിഗോഗുലന്റ്, ഹീമോലിറ്റിക് ഇഫക്റ്റുകൾ ഉണ്ട്.വിഷാംശമുള്ള PLA2 തന്മാത്രയിൽ 18 തരം അമിനോ ആസിഡുകളുടെ 123 അവശിഷ്ടങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു.തന്മാത്രയിൽ സിസ്റ്റൈൻ (14), അസ്പാർട്ടിക് ആസിഡ് (14), ഗ്ലൈസിൻ (12) എന്നിവയാൽ സമ്പന്നമാണ്, എന്നാൽ ഒരു മെഥിയോണിൻ മാത്രമേ അടങ്ങിയിട്ടുള്ളൂ, അതിന്റെ എൻ-ടെർമിനൽ സെറിൻ അവശിഷ്ടമാണ്.ടുഗ്വാങ് വേർതിരിച്ച PLA2 മായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, രണ്ട് ഐസോഎൻസൈമുകളുടെ തന്മാത്രാ ഭാരവും അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങളുടെ എണ്ണവും വളരെ സാമ്യമുള്ളതാണ്, കൂടാതെ അമിനോ ആസിഡ് ഘടനയും വളരെ സാമ്യമുള്ളതാണ്, എന്നാൽ അസ്പാർട്ടിക് ആസിഡിന്റെയും പ്രോലിൻ അവശിഷ്ടങ്ങളുടെയും എണ്ണം കുറച്ച് വ്യത്യസ്തമാണ്.ഗുവാങ്‌സി രാജവെമ്പാലയുടെ വിഷത്തിൽ സമ്പന്നമായ PLA2 അടങ്ങിയിട്ടുണ്ട്.ഷു യുയാൻ തുടങ്ങിയവർ.(1989) വിഷത്തിൽ നിന്ന് PLA2 വേർതിരിച്ചു, അത് യഥാർത്ഥ വിഷത്തേക്കാൾ 3.6 മടങ്ങ് കൂടുതലുള്ള ഒരു പ്രത്യേക പ്രവർത്തനം, 13000 തന്മാത്രാ ഭാരം, 122 അമിനോ ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ, 8.9 ഐസോഇലക്ട്രിക് പോയിന്റ്, നല്ല താപ സ്ഥിരത എന്നിവയുണ്ട്.ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ അടിസ്ഥാന PLA2 ന്റെ സ്വാധീനം ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പ് നിരീക്ഷണത്തിൽ നിന്ന്, അത് മനുഷ്യന്റെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ സ്തരത്തിൽ വ്യക്തമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തുന്നുവെന്ന് കാണാൻ കഴിയും, എന്നാൽ ആടിന്റെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ വ്യക്തമായ സ്വാധീനമില്ല.മനുഷ്യർ, ആട്, മുയൽ, ഗിനിയ പന്നികൾ എന്നിവയിലെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ഇലക്ട്രോഫോറെറ്റിക് വേഗതയിൽ ഈ PLA2 വ്യക്തമായ റിട്ടാർഡേഷൻ പ്രഭാവം ചെലുത്തുന്നു.ചെൻ തുടങ്ങിയവർ.എഡിപി, കൊളാജൻ, സോഡിയം അരാച്ചിഡോണിക് ആസിഡ് എന്നിവയാൽ പ്രചോദിപ്പിക്കപ്പെടുന്ന പ്ലേറ്റ്‌ലെറ്റ് അഗ്രഗേഷൻ തടയാൻ ഈ എൻസൈമിന് കഴിയും.PLA2 കോൺസൺട്രേഷൻ 10/xg/ml~lOOjug/ml ആയിരിക്കുമ്പോൾ, പ്ലേറ്റ്‌ലെറ്റ് അഗ്രഗേഷൻ പൂർണ്ണമായും തടസ്സപ്പെടും.കഴുകിയ പ്ലേറ്റ്‌ലെറ്റുകൾ മെറ്റീരിയലായി ഉപയോഗിച്ചിരുന്നെങ്കിൽ, PLA2 ന് 20Mg/ml എന്ന സാന്ദ്രതയിൽ അഗ്രഗേഷൻ തടയാൻ കഴിയില്ല.ആസ്പിരിൻ സൈക്ലോഓക്‌സിജനേസിന്റെ ഒരു ഇൻഹിബിറ്ററാണ്, ഇത് പ്ലേറ്റ്‌ലെറ്റുകളിൽ PLA2 ന്റെ ഫലത്തെ തടയും.ത്രോംബോക്സെയ്ൻ എ 2 സമന്വയിപ്പിക്കാൻ അരാച്ചിഡോണിക് ആസിഡ് ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യുന്നതിലൂടെ പ്ലേറ്റ്ലെറ്റ് അഗ്രഗേഷനെ PLA2 തടഞ്ഞേക്കാം.Zhejiang പ്രവിശ്യയിലെ Agkistrodon ഹാലിസ് പല്ലാസ് വിഷം ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്ന PLA2 ന്റെ പരിഹാര രൂപീകരണം വൃത്താകൃതിയിലുള്ള ഡൈക്രോയിസം, ഫ്ലൂറസെൻസ്, യുവി ആഗിരണം എന്നിവയിലൂടെ പഠിച്ചു.ഈ എൻസൈമിന്റെ പ്രധാന ശൃംഖല ഘടന മറ്റ് ജീവികളിൽ നിന്നും ജനുസ്സുകളിൽ നിന്നുമുള്ള അതേ തരത്തിലുള്ള എൻസൈമിന് സമാനമാണെന്നും അസ്ഥികൂടത്തിന്റെ ഘടനയ്ക്ക് നല്ല താപ പ്രതിരോധം ഉണ്ടെന്നും ആസിഡ് പരിതസ്ഥിതിയിലെ ഘടനാപരമായ മാറ്റം പഴയപടിയാക്കാമെന്നും പരീക്ഷണ ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു.ആക്റ്റിവേറ്റർ Ca2+, എൻസൈം എന്നിവയുടെ സംയോജനം ട്രിപ്റ്റോഫാൻ അവശിഷ്ടങ്ങളുടെ പരിസ്ഥിതിയെ ബാധിക്കില്ല, അതേസമയം ഇൻഹിബിറ്റർ Zn2+ വിപരീതമാണ് ചെയ്യുന്നത്.ലായനിയുടെ pH മൂല്യം എൻസൈം പ്രവർത്തനത്തെ ബാധിക്കുന്ന രീതി മുകളിൽ പറഞ്ഞ റിയാക്ടറുകളിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമാണ്.

പാമ്പ് വിഷത്തിന്റെ PLA2 ശുദ്ധീകരണ പ്രക്രിയയിൽ, ഒരു പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിൽ രണ്ടോ അതിലധികമോ PLA2 എല്യൂഷൻ കൊടുമുടികൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു എന്നതാണ് വ്യക്തമായ ഒരു പ്രതിഭാസം.ഈ പ്രതിഭാസം ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ വിശദീകരിക്കാം: ① ഐസോസൈമുകളുടെ അസ്തിത്വം കാരണം;② ഒരുതരം PLA2 വിവിധ തന്മാത്രാ ഭാരങ്ങളുള്ള വിവിധ PLA2 മിശ്രിതങ്ങളായി പോളിമറൈസ് ചെയ്തിരിക്കുന്നു, അവയിൽ മിക്കതും 9 000~40 000 പരിധിയിലാണ്;③ PLA2-ന്റെയും മറ്റ് പാമ്പ് വിഷ ഘടകങ്ങളുടെയും സംയോജനം PLA2-നെ സങ്കീർണ്ണമാക്കുന്നു;④ PLA2 ലെ അമൈഡ് ബോണ്ട് ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്തതിനാൽ, ചാർജ് മാറുന്നു.① കൂടാതെ ② സാധാരണമാണ്, CrWa/w പാമ്പ് വിഷത്തിലെ PLA2 പോലെയുള്ള ചില ഒഴിവാക്കലുകൾ മാത്രം

രണ്ട് സാഹചര്യങ്ങളുണ്ട്: ①, ②.താഴെ പറയുന്ന പാമ്പുകളുടെ വിഷത്തിൽ PLA2 ൽ മൂന്നാമത്തെ അവസ്ഥ കണ്ടെത്തി: Oxyranus scutellatus, Parademansia microlepidota, Bothrops a^>er, Palestinian viper, sand viper, and terrible rattlesnake km。.

കേസ് ④ ഫലം ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സമയത്ത് PLA2 ന്റെ മൈഗ്രേഷൻ വേഗത മാറ്റുന്നു, എന്നാൽ അമിനോ ആസിഡിന്റെ ഘടന മാറില്ല.ജലവിശ്ലേഷണം വഴി പെപ്റ്റൈഡുകൾ തകർക്കാൻ കഴിയും, പക്ഷേ പൊതുവെ അവ ഇപ്പോഴും ഡൈസൾഫൈഡ് ബോണ്ടുകളാൽ ബന്ധിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു.ഈസ്റ്റേൺ പിറ്റ് റാറ്റിൽസ്‌നേക്കിന്റെ വിഷത്തിൽ PLA2 ന്റെ രണ്ട് രൂപങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അവയെ യഥാക്രമം ടൈപ്പ് എ എന്നും ടൈപ്പ് പി പിഎൽഎ2 എന്നും വിളിക്കുന്നു.ഈ രണ്ട് തരം PLA2 തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസം ഒരു അമിനോ ആസിഡ് മാത്രമാണ്, അതായത്, ഒരു PLA2 തന്മാത്രയിലെ ഗ്ലൂട്ടാമൈൻ മറ്റൊരു PLA2 തന്മാത്രയിലെ ഗ്ലൂട്ടാമിക് ആസിഡ് കൊണ്ട് മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുന്നു.ഈ വ്യത്യാസത്തിന്റെ കൃത്യമായ കാരണം വ്യക്തമല്ലെങ്കിലും, ഇത് PLA2 ന്റെ ഡീമിനേഷനുമായി ബന്ധപ്പെട്ടതാണെന്ന് പൊതുവെ വിശ്വസിക്കപ്പെടുന്നു.ഫലസ്തീനിയൻ വൈപ്പർ വിഷത്തിലെ PLA2 അസംസ്കൃത വിഷം ഉപയോഗിച്ച് ചൂടാക്കിയാൽ, അതിന്റെ എൻസൈം തന്മാത്രകളിലെ അവസാന ഗ്രൂപ്പുകൾ മുമ്പത്തേക്കാൾ കൂടുതലായിരിക്കും.പാമ്പ് വിഷത്തിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത C PLA2 ന് രണ്ട് വ്യത്യസ്ത N-ടെർമിനൽ ഉണ്ട്, അതിന്റെ തന്മാത്രാ ഭാരം 30000 ആണ്. ഈ പ്രതിഭാസം PLA2 ന്റെ അസമമായ ഡൈമർ മൂലമാകാം, ഇത് കിഴക്കൻ ഡയമണ്ട്ബാക്ക് റാറ്റിൽസ്‌നേക്കിന്റെ വിഷത്തിൽ PLA2 രൂപപ്പെടുത്തിയ സമമിതി ഡൈമറിന് സമാനമാണ്. വെസ്റ്റേൺ ഡയമണ്ട്ബാക്ക് റാറ്റിൽസ്നേക്കും.ഏഷ്യൻ മൂർഖൻ നിരവധി ഉപജാതികൾ ഉൾക്കൊള്ളുന്നു, അവയിൽ ചിലത് വർഗ്ഗീകരണത്തിൽ വളരെ വ്യക്തമല്ല.ഉദാഹരണത്തിന്, കോബ്ര ഔട്ടർ കാസ്പിയൻ ഉപജാതി എന്ന് വിളിച്ചിരുന്നത് ഇപ്പോൾ അംഗീകരിക്കപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു

ഔട്ടർ കാസ്പിയൻ കടൽ മൂർഖനാൽ അത് ആട്രിബ്യൂട്ട് ചെയ്യണം.നിരവധി ഉപജാതികൾ ഉള്ളതിനാൽ അവ ഒരുമിച്ച് കലർന്നതിനാൽ, വിവിധ സ്രോതസ്സുകൾ കാരണം പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിന്റെ ഘടന വളരെയധികം വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ PLA2 ഐസോസൈമുകളുടെ ഉള്ളടക്കവും ഉയർന്നതാണ്.ഉദാഹരണത്തിന്, മൂർഖൻ വിഷം

R ^ ll സ്പീഷിസുകളുടെ കുറഞ്ഞത് 9 തരം PLA2 ഐസോസൈമുകൾ കണ്ടെത്തി, കൂടാതെ 7 തരം PLA2 ഐസോസൈമുകൾ കാസ്പിയൻ എന്ന മൂർഖൻ ഉപജാതിയുടെ വിഷത്തിൽ കണ്ടെത്തി.ഡർക്കിൻ തുടങ്ങിയവർ.(1981) PLA2 ഉള്ളടക്കവും വിവിധ പാമ്പ് വിഷങ്ങളിലെ ഐസോസൈമുകളുടെ എണ്ണവും പഠിച്ചു, അതിൽ 18 മൂർഖൻ വിഷങ്ങൾ, 3 മാമ്പ വിഷങ്ങൾ, 5 വൈപ്പർ വിഷങ്ങൾ, 16 റാറ്റിൽസ്‌നേക്ക് വിഷങ്ങൾ, 3 കടൽ പാമ്പ് വിഷങ്ങൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു.പൊതുവേ, ധാരാളം ഐസോസൈമുകളുള്ള മൂർഖൻ വിഷത്തിന്റെ PLA2 പ്രവർത്തനം ഉയർന്നതാണ്.വൈപ്പർ വിഷത്തിന്റെ PLA2 പ്രവർത്തനവും ഐസോസൈമുകളും ഇടത്തരം ആണ്.മാമ്പ വിഷത്തിന്റെയും റാറ്റിൽസ്‌നേക്ക് വിഷത്തിന്റെയും PLA2 പ്രവർത്തനം വളരെ കുറവാണ് അല്ലെങ്കിൽ PLA2 പ്രവർത്തനമില്ല.കടൽ പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിന്റെ PLA2 പ്രവർത്തനവും കുറവാണ്.

ഈസ്റ്റേൺ റോംബോഫോറ റാറ്റിൽസ്‌നേക്ക് (C. പാമ്പ് വിഷത്തിൽ ടൈപ്പ് എ, ടൈപ്പ് പി പിഎൽഎ2 എന്നിവ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, ഇവ രണ്ടും ഒരേപോലെയുള്ള രണ്ട് ഉപഘടകങ്ങൾ ചേർന്നതാണ്. , ഒപ്പം dimerase മാത്രമേ ഉള്ളൂ

പ്രവർത്തനം.ഷെൻ തുടങ്ങിയവർ.പാമ്പിന്റെ വിഷത്തിന്റെ PLA2 ന്റെ ഡൈമർ മാത്രമാണ് എൻസൈമിന്റെ സജീവ രൂപം എന്നും നിർദ്ദേശിച്ചു.പാശ്ചാത്യ ഡയമണ്ട്ബാക്ക് റാറ്റിൽസ്‌നേക്കിന്റെ PLA2 ഡൈമറിന്റെ രൂപത്തിൽ ഉണ്ടെന്നും സ്പേഷ്യൽ ഘടനയെക്കുറിച്ചുള്ള പഠനം തെളിയിക്കുന്നു.പിസിവോറസ് സംയുക്തം

പാമ്പ് വിഷത്തിന്റെ രണ്ട് വ്യത്യസ്ത PLA ^ Ei, E2 എന്നിവയുണ്ട്, അതിൽ 仏 ഡൈമറിന്റെ രൂപത്തിൽ നിലവിലുണ്ട്, ഡൈമർ സജീവമാണ്, അതിന്റെ വിഘടിച്ച മോണോമർ നിഷ്‌ക്രിയമാണ്.ലു യിങ്‌ഹുവ തുടങ്ങിയവർ.(1980) ഇ. ജയന്തി മറ്റുള്ളവരുടെ ഭൗതികവും രാസപരവുമായ ഗുണങ്ങളും പ്രതികരണ ചലനാത്മകതയും കൂടുതൽ പഠിച്ചു.(1989) വൈപ്പർ വിഷത്തിൽ നിന്ന് അടിസ്ഥാന PLA2 (VRVPL-V) വേർതിരിച്ചു.മോണോമർ PLA2 ന്റെ തന്മാത്രാ ഭാരം 10000 ആണ്, ഇതിന് മാരകമായ, ആൻറിഓകോഗുലന്റ്, എഡിമ ഇഫക്റ്റുകൾ ഉണ്ട്.എൻസൈമിന് PH 4.8 എന്ന അവസ്ഥയിൽ വ്യത്യസ്ത തന്മാത്രാഭാരമുള്ള പോളിമറുകളെ പോളിമറൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയും, കൂടാതെ പോളിമറൈസേഷന്റെ അളവും പോളിമറുകളുടെ തന്മാത്രാഭാരവും താപനില വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് വർദ്ധിക്കുന്നു.96 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്ന പോളിമറിന്റെ തന്മാത്രാ ഭാരം 53 100 ആണ്, ഈ പോളിമറിന്റെ PLA2 പ്രവർത്തനം രണ്ടായി വർദ്ധിക്കുന്നു.